НАУКА ОБРАЗОВАНИЯ - издательский дом

Switch to desktop

Материалы

ДИАГНОСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ СОСУДИСТОГО БАКТЕРИОЗА КРЕСТОЦВЕТНЫХ МЕТОДОМ ДОТ-ИММУНОАНАЛИЗА

 

Журнал «НАУЧНАЯ ЖИЗНЬ»  [СКАЧАТЬ СТАТЬЮ В PDF]
тОМ 17, выпУСК 4, 2022 

Рубрика: АГРОНОМИЯ
DOI: 10.35679/1991-9476-2022-17-4
   
Для цитирования:

Кузнецов М. А., Щербаков А. А., Ларионова О. С., Киреев М. Н. Диагностика возбудителя сосудистого бактериоза крестоцветных методом дот-иммуноанализа // Научная жизнь. 2022. Т. 17. Вып. 4.

   
Авторы: 

Кузнецов Михаил Андреевич, аспирант кафедры «Микробиология, биотехнология и химия», ФГБОУ ВО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н. И. Вавилова»: Россия, 410012, Саратовская обл., г. Саратов, Театральная пл., 1.
Щербаков Анатолий Анисимович, д-р биол. наук, профессор, ФГБОУ ВО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н. И. Вавилова»: Россия, 410012, Саратовская обл., г. Саратов, Театральная пл., 1.
Ларионова Ольга Сергеевна, д-р биол. наук, доцент, зав. кафедрой «Микробиология, биотехнология и химия», ФГБОУ ВО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н. И. Вавилова»: Россия, 410012, Саратовская обл., г. Саратов, Театральная пл., 1.
Киреев Михаил Николаевич, канд. мед. наук, зав. лабораторией «Биохимия и протеомика», ФКУН «Российский противочумный институт "Микроб" Роспотребнадзора»: Россия, 410005, г. Саратов, ул. Университетская, 46.

 

Тел.: (917) 318-99-44
E-mail: scherbakov.2014@yandex.ru

   
Реферат: 

В представленной работе рассматривается возможность использования метода дот-иммуноанализа для диагностики возбудителя сосудистого бактериоза крестоцветных. Заболевание отличается вредоносностью, и поэтому контроль обсеменённости им сельхозугодий и хранилищ урожая имеет важное хозяйственное значение. Для решения этой задачи, на основе белков клеточной стенки возбудителя была получена высокоспецифичная кроличья гипериммунная сыворотка. Так как видовой состав микрофлоры, встречающейся в условиях сельхозугодий, отличается широким разнообразием родов и видов, была проведена экспериментальная оценка способности предлагаемой сыворотки и метода в целом к выявлению патогена в условиях, приближенных к полевым. Для этого приготовлялись экстракты листьев растений капусты белокочанной – опытных образцов, взятых в поле и полученных из торговой сети, и выращенных в лабораторных условиях контрольных образцов – проверяемых затем методом дот-иммуноанализа. В результате было установлено, что диагностический препарат обладает специфичностью, достаточной для обнаружения возбудителя сосудистого бактериоза крестоцветных в условиях контаминации нецелевой микрофлорой и присутствия клеток растительных тканей, а выбранный метод пригоден для создания индивидуальных и комплексных систем экспресс-тестов, пригодных для нужд фитосанитарного контроля продукции растениеводства. Благодаря низкой стоимости расходных материалов, простоте рабочих приёмов и возможности автоматизации процесса, предлагаемый способ может быть эффективно внедрён в повседневную практику для оценки состояния поступающего на хранение урожая – что поможет сократить его потери, улучшить качество реализуемого товара и сократить затраты труда и рабочего времени при закладке овощей на склады.

   
Ключевые слова: сосудистый бактериоз, крестоцветные, капуста белокочанная, фитосанитарный контроль, диагностика, обнаружение, Xanthomonas campestris, иммуноанализ, дот-иммуноанализ, тест-система
   

Список литературы:

1. Игнатов А. Н. Распространение возбудителей опасных бактериозов растений в Российской Федерации // Бактериальные и фитоплазменные болезни сельскохозяйственных растений. Защита картофеля: сб. тр. междунар. науч.-практич. конф. – Большие Вяземы: ВНИИ фитопатологии, 2014 г. – № 2. С. 53–57.

2. Козулин В. В. Углеводсодержащие биополимеры Xanthomonas campestris и их роль в фитопатогенных процессах: Автореф… дис. д-ра биол. наук. – Саратов: СГАУ, 2009. – 21 с.
3. Мазурин Е. С., Джалилов Ф. С., Игнатов А. Н. Диагностика зараженности семян капусты сосудистым бактериозом методом ИФА // Доклады ТСХА. – 2009. – Вып. 281. – С. 24-26.
4. Попов Ф. А. Болезни капусты белокочанной в период хранения // Защита растений и карантин. – 2011. – № 9. – С. 25-28.
5. ГОСТ 51809 – 2001 Капуста белокочанная свежая, реализуемая в розничной торговой сети. – М.: Стандартинформ, 2010. – 10 с.
6. Плугов А. Г. Посевные площади и валовые сборы капусты в России. Итоги 2018 года [Электронный ресурс] // Экспертноаналитический центр агробизнеса. – Режим доступа: https://abcentre.ru/news/posevnye-ploschadi-i-valovye-sbory-kapusty-v-rossii-itogi-2018-goda (дата обращения 22.05.2020).
7. Мазурин Е. С., Джалилов Ф. С., Игнатов А. Н., Варицев Ю. А. Усовершенствование диагностики зараженности семян капусты сосудистым бактериозом методом иммуноферментного анализа // Известия ТСХА. – 2009. – Вып. 1. – С. 66-72
8. Lema M., Soengas P., Velasco P., Francisco M., Cartea M. E. Identification of Sources of Resistance to Xanthomonas campestris pv. campestris in Brassica napus Crops // Plant Dis. – 2011. – Vol. 95. – Pp. 292-297.
9. Lizyben C., Cornelius C. B. Characterisation of Xanthomonas campestris pv. campestris isolates from South Africa using genomic DNA fingerprinting and pathogenicity tests // Eur J Plant Pathol. – 2012. – Vol. 133. – Pp. 811-818.
10. Носкова О. А., Загоскина Т. Ю., Субычева Е. Н. Применение дот-иммуноанализа для выявления антигенов чумного микроба в посевном материале // Проблемы особо опасных инфекций. – 2014 – Вып. 3. – С. 69-71.
11. Полтавченко А. Г., Ерш А. В., Крупницкая Ю. А. Выбор системы детекции для мультиплексного дот-иммуноанализа антител // Клиническая лабораторная диагностика. – 2016. – № 61 (4). – С. 229-233.
12. Кузнецов М. А., Щербаков А. А., Савина С. В., Скорляков В. М., Иващенко С. В., Муртаева В. С. Получение специфических антител к клеточным мембранам Xanthomonas campestris // Аграрный научный журнал. – 2017. – № 6. – С. 46–49.
13. Frens G. Controlled Nucleation for the Regulation of the Particle Size in Monodisperse Gold Suspension // Nature Phys. Sci. – 1973. – Vol. 241. – № 1. – P. 20-22.

   
English version:

DIAGNOSIS OF THE CAUSATIVE AGENT OF CRUCIFEROUS VASCULAR BACTERIOSIS BY DOT-IMMUNOANALYSIS

 

Kuznetsov Mikhail Andreevich, postgraduate student of the Depart. of Microbiology, Biotechnology and Chemistry, Saratov State Agrarian University named after N. I. Vavilov, Saratov, Russia.
Shcherbakov Anatoly Anisimovich, Dr. of Biol. Sci., Prof., Saratov State Agrarian University named after N. I. Vavilov, Saratov, Russia.
Larionova Olga Sergeevna, Dr. of Biol. Sci., Ass. Prof., Head of the Depart. of Microbiology, Biotechnology and Chemistry, Saratov State Agrarian University named after N. I. Vavilov, Saratov, Russia.
Kireev Mikhail Nikolaevich, Cand. of Med. Sci., Head of the Laboratory of Biochemistry and Proteomics, Russian Anti-Plague Institute "Microbe" of Rospotrebnadzor, Saratov, Russia.

 

Keywords: vascular bacteriosis, cruciferous, white cabbage, phytosanitary control, diagnostics, detection, Xanthomonas campestris, immunoassay, dot-immunoassay, test system.

 

Abstract. In the presented work, the possibility of using the dot-immunoassay method for diagnosing the causative agent of cruciferous vascular bacteriosis is considered. The disease is characterized by harmfulness, and therefore the control of the contamination of agricultural lands and crop storages with it is of great economic importance. To solve this problem, highly specific hyperimmune rabbit serum was obtained on the basis of pathogen cell wall proteins. Since the species composition of the microflora found in farmland conditions is characterized by a wide variety of genera and species, an experimental assessment was made of the ability of the proposed serum and the method as a whole to detect the pathogen under conditions close to the field. For this, extracts of white cabbage plant leaves were prepared - experimental samples taken in the field and obtained from the distribution network, and control samples grown in laboratory conditions - then checked by dot-immunoassay. As a result, it was found that the diagnostic product has specificity sufficient to detect the causative agent of cruciferous vascular bacteriosis under conditions of contamination with non-target microflora and the presence of plant tissue cells, and the chosen method is suitable for creating individual and complex rapid test systems suitable for the needs of phytosanitary control of crop production. Due to the low cost of consumables, the simplicity of working methods and the possibility of automating the process, the proposed method can be effectively implemented into everyday practice to assess the condition of the crop arriving for storage - which will help reduce its losses, improve the quality of the goods sold and reduce labor costs and working time when laying vegetables to warehouses.

   
   For citation: Kuznetsov, M.A., Shcherbakov, A.A., Larionova, O.S., Kireev, M.N. (2022) Diagnosis of the causative agent of cruciferous vascular bacteriosis by dot-immunoanalysis. Nauchnaya zhizn' [Scientific Life], vol. 17, iss. 4. (in Russian)

 

К содержанию»