НАУКА ОБРАЗОВАНИЯ - издательский дом

Switch to desktop

Материалы

ДИАГНОСТИКА БАКТЕРИАЛЬНЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ИНФЕКЦИЙ У СВИНЕЙ С ПОМОЩЬЮ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИЕЙ С ГИБРИДИЗАЦИОННО-ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ

 

Журнал «НАУЧНАЯ ЖИЗНЬ»  [СКАЧАТЬ СТАТЬЮ В PDF]
тОМ 18, выпУСК 4, 2023 

Рубрика: ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ И ИММУНОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ
DOI: 10.35679/1991-9476-2023-18-4
   
Для цитирования:

Толстова Е. А., Агольцов В. А., Черных О. Ю., Калабеков М. И., Падило Л. П., Бирюкова О. П. Диагностика бактериальных респираторных инфекций у свиней с помощью полимеразной цепной реакцией с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени // Научная жизнь. 2023. Т. 18. Вып. 4 (130)

   
Авторы: 

Толстова Елизавета Антоновна, аспирант кафедры «Болезни животных и ветеринарно-санитарная экспертиза», ФГБОУ ВО «Саратовский государственный университет генетики, биотехнологии и инженерии им. Н. И. Вавилова»: Россия, 410012, г. Саратов, пр-кт им. Петра Столыпина, зд. 4, стр. 3.
Агольцов Валерий Александрович, д-р ветеринар. наук, профессор, профессор кафедры «Болезни животных и ветеринарно-санитарная экспертиза», ФГБОУ ВО «Саратовский государственный университет генетики, биотехнологии и инженерии им. Н. И. Вавилова»: Россия, 410012, г. Саратов, пр-кт им. Петра Столыпина, зд. 4, стр. 3.
Черных Олег Юрьевич, д-р ветеринар. наук, профессор, Заслуженный изобретатель РФ, Заслуженный работник сельского хозяйства РФ, Почетный работник АПК России, Заслуженный ветеринарный врач Кубани, директор ГБУ КК «Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория»: Россия, 352391, Краснодарский край, г. Кропоткин, ул. Красноармейская, 303.
Калабеков Муталиф Ибрагимович, д-ра ветеринар. наук, профессор, профессор кафедры «Зоотехния и ветеринарно-санитарная экспертиза» ФГБОУ ВО «Кабардино-Балкарский государственный аграрный университет им. В. М. Кокова»: Россия, 360030, Кабардино-Балкарская Республика, г. Нальчик, пр-кт Ленина, 1в.
Падило Лариса Павловна, канд. биол. наук, доцент кафедры «Болезни животных и ветеринарно-санитарная экспертиза», ФГБОУ ВО «Саратовский государственный университет генетики, биотехнологии и инженерии им. Н. И. Вавилова»: Россия, 410012, г. Саратов, пр-кт им. Петра Столыпина, зд. 4, стр. 3.
Бирюкова Оксана Петровна, канд. ветеринар. наук, доцент, доцент кафедры «Болезни животных и ветеринарно-санитарная экспертиза», ФГБОУ ВО «Саратовский государственный университет генетики, биотехнологии и инженерии им. Н. И. Вавилова»: Россия, 410012, г. Саратов, пр-кт им. Петра Столыпина, зд. 4, стр. 3.


Тел.: (917) 207-40-45
E-mail: Agoltsov-Saratov@yandex.ru

   
Реферат: 

Показаниями для лабораторного исследования с целью проведения этиологической диагностики бактериальных респираторных инфекций явилось наличие у свиней остро возникшего заболевания с локальными симптомами поражения дыхательных путей. Целью исследования стало применение ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени для обнаружения бактериальных возбудителей респираторных инфекций свиней Mycoplasma hyopneumoniae, Streptococcus pneumoniae, Pasterella multocida, Staphylococcus aureus. Использовали ПЦР-наборы «Вет-фактор» (Россия) и ООО НПФ «Литех» (Россия). Материалом для лабораторных исследований служили: кровь, смывы со слизистой оболочки носа, кусочки паренхиматозных органов, лимфатические узлы, трахеи и миндалины от свиноматок и трупов поросят возрастом от одного до четырёх месяцев. Для постановки реакций было задействовано следующее оборудование: Амплификатор «Real-time CFX Connect» (Bio-Rad Laboratories, США). Учет результатов ПЦР-анализа проводился по наличию или отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией (что соответствует наличию или отсутствию значения порогового цикла «Ct» для исследуемого образца). Результаты, полученные при проведении лабораторных диагностических исследований материала от свиней, поступившего в Кропоткинскую краевую лабораторию за последние 4 года (с 2019 по 2022 гг.) свидетельствуют о высокой частоте обнаружения бактериальных возбудителей респираторных инфекций свиней (от 10 до 72%). ПЦР - диагностика с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени оптимальна для быстрого обнаружения Mycoplasma hyopneumoniae, Streptococcus pneumoniae, Pasterella multocida, Staphylococcus aureus у свиней.

   
Ключевые слова: диагностика, ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени, Mycoplasma hyopneumoniae, Streptococcus pneumoniae, Pasterella multocida, Staphylococcus aureus, свиньи, бактериальные инфекции
   

Список литературы:

1. Агольцов В. А., Падило Л. П., Бирюкова О. П., Лигидова М. М. Эффективность и безопасность лекарственных препаратов при лечении экспериментальных и спонтанных микоплазменных инфекций // Ветеринария сегодня. – 2022. – № 11. – С. 169-175.

2. Бирюченкова М. В. Разработка методов обнаружения генома Streptococcus suis на основе полимеразной цепной реакции // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. – Владимир, 2017. – Том 15 – С. 70-81.
3. Ефанова Л. И., Степанов А. В., Свиридов М. М., Манжурина О. А. Микоплазменная инфекция у свиней // Достижения науки и техники АПК. – 2012. - № 1. – С. 35-36.
4. Лигидова М. М., Агольцов В. А., Падило Л. П., Гусев А. А. Терапевтическая эффективность энтрикима при энзоотической пневмонии свиней // Научная жизнь. – 2020. – Вып. 9. – С. 1260-1269.
5. Лигидова М. М., Толстова Е. А., Семиволос А. М., Агольцов В. А., Мариничева М. П. Изучение фармакокинетики действующих веществ препарата «Энтриким» при применении его животным // Аграрный научный журнал. – 2022. – № 8. – С. 47-49.
6. Сухинин А. А., Использование ПЦР для идентификации патогенных стрептококков // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. – 2010. – № 2 – С. 13-15.
7. Толстова Е. А., Агольцов В. А., Падило Л. П. Особенности диагностики и терапии стрептококкоза свиней, осложненного РРСС на племенной ферме // Научная жизнь – 2022. – Том 17, выпуск 1. – С. 157-166.
8. Толстова Е. А., Лигидова М. М., Падило Л. П., Семиволос А. М., Агольцов В. А. Диагностика, терапия и специфическая профилактика стрептококкоза свиней, осложненного пастереллезом и микоплазмом // Аграрный научный журнал. – 2022. – № 1. – С. 71-75.
9. Толстова Е. А., Лигидова М. М., Агольцов В. А., Черных О. Ю., Падило Л. П., Попова О. М. ПЦР-диагностика с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени для быстрого обнаружения Mycoplama hyopneumoniae в ассоциации с Streptococcus pneumoniae у свиней // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана. – 2023. – Том 254, № 2. – С. 264-272.
10. Clark L. K., Wu C. C., Alstine W. G., Knox K. E. Evaluation of the effectiveness of a macrolide antibiotic on reduction of respiratory pathogens in 12-day and 21-day weaned pigs // J. Swine Health Prod. – 1998. – № 6 (6)ю – P. 257–262.
11. Dacak D., Petters J., Batista-Cirne L., Lucero M., Aliendre R., Guzmán J., Ordoñez R. Primer reporte de micoplasmosis en Procyon cancrivorus en cautiverio en Asunción, Paraguay // Rev. Inv. Vet. Perú. – 2021. – № 32 (1). e19494. DOI: 10.15381/RIVEP.V32I1.19494.
12. De Almeida J. F., do Nascimento E. R., de Almeida Pereira V. L., Barreto M. L., de Martino Campos C. A., de Azevedo E. O. Polimerase chain reaction (PCR) in the diagnosis of goat mycoplasmosis proceeding from cultures stored in glycerol // Rev. Bras. Med. Vet. – 2007. – № 29 (2). – P. 54–57.
13. McKelvie J., Morgan J. H., Nanjiani I. A., Sherington J., Rowan T. G., Sunderland S. J. Evaluation of tulathromycin for the treatment of pneumonia following experimental infection of swine with Mycoplasma hyopneumoniae // Veterinary Therapeutics. – 2005. – № 6 (2). – P. 197–202. PMID: 16094566.
14. Morrow C. J., Kreizinger Z., Achari R. R., Bekő K., Yvon C., Gyuranecz M. Antimicrobial susceptibility of pathogenic mycoplasmas in chickens in Asia // Vet. Microbiol. – 2020. – № 250. – 108840. DOI: 10.1016/j.vetmic.2020.108840.
15. Olson L. B., Bäckström L. R. The effect of tilmicosin in minimizing atrophic rhinitis, pneumonia, and pleuritis in swine // J. Swine Health Prod. – 2000. № 8 (6). – P. 263–268.

   
English version:

DIAGNOSIS OF BACTERIAL RESPIRATORY INFECTIONS IN PIGS USING POLYMERASE CHAIN REACTION WITH HYBRIDIZATION-FLUORESCENCE DETECTION IN REAL TIME

 

Tolstova Elizaveta Antonovna, Postgraduate of the Depart. of Animal Diseases and Veterinary and Sanitary Expertise, Saratov State University of Genetics, Biotechnology and Engineering named after N.I. Vavilov, Saratov, Russia.
Agoltsov Valery Aleksandrovich, Dr. of Vet. Sci., Prof., Prof. of the Depart. of Animal Diseases and Veterinary and Sanitary Expertise, Saratov State University of Genetics, Biotechnology and Engineering named after N.I. Vavilov, Saratov, Russia.
Chernykh Oleg Yuryevich, Dr. of Vet. Sci., Prof., Honored Inventor of the Russian Federation, Honored Worker of Agriculture of the Russian Federation, Honorary Worker of the Agro-Industrial Complex of Russia, Honored Veterinarian of Kuban, Director of Kropotkin Regional Veterinary Laboratory, Kropotkin, Russia.
Kalabekov Mutalif Ibragimovich, Dr. of Vet. Sci., Prof., Prof. of the Depart. of Animal Science and Veterinary and Sanitary Expertise, Kabardino-Balkarian State Agrarian University named after V.M. Kokov, Nalchik, Russia.
Padilo Larisa Pavlovna, Cand. of Biol. Sci., Ass. Prof. of the Depart. of Animal Diseases and Veterinary and Sanitary Expertise, Saratov State University of Genetics, Biotechnology and Engineering named after N.I. Vavilov, Saratov, Russia.
Biryukova Oksana Petrovna, Cand. of Vet. Sci., Ass. Prof., Ass. Prof. of the Depart. of Animal Diseases and Veterinary and Sanitary Expertise, Saratov State University of Genetics, Biotechnology and Engineering named after N.I. Vavilov, Saratov, Russia.

 

Keywords: diagnostics, PCR with hybridization-fluorescence detection in real time, Mycoplasma hyopneumoniae, Streptococcus pneumoniae, Pasterella multocida, Staphylococcus aureus, pigs, bacterial infections.

 

Abstract. Indications for laboratory testing for the purpose of etiological diagnosis of bacterial respiratory infections were the presence in pigs of an acute disease with local symptoms of respiratory tract damage. The aim of the study was to use PCR with hybridization-fluorescence detection in real time to detect bacterial pathogens of respiratory infections of pigs Mycoplasma hyopneumoniae, Streptococcus pneumoniae, Pasterella multocida, Staphylococcus aureus. We used PCR kits "Vet-factor" (Russia) and LLC NPF "Litech" (Russia). The materials for laboratory studies were: blood, flushes from the nasal mucosa, pieces of parenchymal organs, lymph nodes, trachea and tonsils from sows and corpses of piglets aged from one to four months. The following equipment was used to set up the reactions: The Real-time CFX Connect amplifier (Bio-Rad Laboratories, USA). The results of the PCR analysis were taken into account by the presence or absence of the intersection of the fluorescence curve with the threshold line set at the appropriate level (which corresponds to the presence or absence of the threshold cycle value "Ct" for the sample under study). The results obtained during laboratory diagnostic studies of the material from pigs received by the Kropotkin regional Laboratory over the past 4 years (from 2019 to 2022) indicate a high frequency of detection of bacterial pathogens of respiratory infections in pigs (from 10 to 72%). PCR diagnostics with real-time hybridization-fluorescence detection is optimal for rapid detection of Mycoplasma hyopneumoniae, Streptococcus pneumoniae, Pasterella multocida, Staphylococcus aureus in pigs.

   
   For citation: Tolstova, E.A., Agoltsov, V.A., Chernykh, O.Yu., Kalabekov, M.I., Padilo, L.P., Biryukova, O.P. (2023) Diagnosis of bacterial respiratory infections in pigs using polymerase chain reaction with hybridization-fluorescence detection in real time. Nauchnaya zhizn' [Scientific Life], vol. 18, iss. 4 (130). (in Russian)

 

К содержанию»