Микаилов М. М., Гунашев Ш. А., Черных О. И., Халиков А. А. Диагностическое значение реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) в сравнении с ИФА и другими серологическими тестами при диагностике бруцеллеза крупного рогатого скота // Научная жизнь. 2022. Т. 17. Вып. 3. С. 454–459. DOI: 10.35679/1991-9476-2022-17-3-454-459 // Научная жизнь. 2022. Т. 17. Вып. 3.

Микаилов Микаил Муслимович, канд. ветеринар. наук, вед. науч. сотр. лаборатории «Инфекционная патология сельскохозяйственных животных», Прикаспийский зональный НИВИ – филиал ФГБНУ «Федеральный аграрный научный центр Республики Дагестан»: Россия, 367000, Республика Дагестан, г. Махачкала, ул. Дахадаева, 88.
Гунашев Шахрудин Алиевич, канд. ветеринар. наук, ст. науч. сотр. лаборатории «Инфекционная патология сельскохозяйственных животных», Прикаспийский зональный НИВИ – филиал ФГБНУ «Федеральный аграрный научный центр Республики Дагестан»: Россия, 367000, Республика Дагестан, г. Махачкала, ул. Дахадаева, 88.
Черных Олег Юрьевич, д-р ветеринар. наук, профессор, директор ГБУ КК «Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория»: Россия, 352391, Краснодарский край, г. Кропоткин, ул. Красноармейская, 303.
Халиков Ахмед Алиасхабович, науч. сотр. лаборатории «Инфекционная патология сельскохозяйственных животных», Прикаспийский зональный НИВИ – филиал ФГБНУ «Федеральный аграрный научный центр Республики Дагестан»: Россия, 367000, Республика Дагестан, г. Махачкала, ул. Дахадаева, 88.

Тел.: (861-38) 6-23-14
E-mail: gukkvl50@kubanvet.ru

Представлены результаты сравнительных диагностических исследований сывороток крови от крупного рогатого скота на бруцеллез из хозяйств с различной эпизоотической ситуацией, выполненных в лаборатории Прикаспийского зонального НИВИ – о филиал ФГБНУ «ФАНЦ РД» и ГБУ «Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория». Изучена диагностическая эффективность реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) с применением эритроцитарного антигена, в сравнении с другими серологическими методами, такими, как иммуноферментный анализ (ИФА), реакция агглютинации (РА), реакция склеивания комплемента (РСК), роз-бенгал проба (РБП), реакция иммунодиффузии с О-ПС антигеном (РИД с О-ПС антигеном). С целью определения специфичности серологических тестов исследованы на бруцеллез в РНГА, ИФА, РА, РСК, РБП и РИД с О-ПС антигеном 52 пробы сыворотки крови невакцинированных против бруцеллеза животных из благополучного хозяйства. Все образцы сыворотки крови были исследованы с отрицательным результатом. Определение чувствительности испытуемых средств диагностики выполнено с использованием 82 проб сыворотки крови от коров, иммунизированных вакциной из штамма B. abortus 82, из неблагополучного по бруцеллезу хозяйства. Результаты исследований показали, что инфекция в стаде протекает в острой форме, о чем свидетельствует значительный процент положительно реагирующих на бруцеллез животных в РИД и высокие титры РНГА, РА и РСК. Так, положительная РНГА получена в 20 случаях (24,4%), ИФА с тест системой ООО НПФ «Сиббиотест» выявила 31 больного животного (37,8%), РСК – 20 (24,4%), РА и РБП – 17 (20,7%), тест система ИФА фирмы «Биок» – 15 (18,3%), РИД с О-ПС антигеном – 9 (11%). Важно отметить, что РНГА дополнительно выявила положительно реагирующих на бруцеллез животных: к ИФА «Биок» – 5 (6,1%), РА и РБП – 3 (3,7%), РИД – 11 (13,4%). Результаты проведенных нами исследований показали, что метод РНГА является одним из наиболее чувствительных тестов, позволяющих выявить в неблагополучном хозяйстве высокий процент больных бруцеллезом животных (24,4% к исследованным), что превосходит результаты других серологических методов. Результаты сравнительных серологических исследований сывороток крови крупного рогатого скота в РНГА, ИФА, РА, РСК, РБП и РИД с О-ПС подтвердили специфичность тестов и высокую чувствительность метода РНГА с антигеном бруцеллезным эритроцитарным.

Список литературы:

1. Винокуров Н. В. Особенности диагностической ценности реакции непрямой гемагглютинации при бруцеллезе северных оленей : автореф. дис. ... канд. вет. наук. – Якутск, 2010. – 18 с.

2. Дегтяренко Л. В., Скляров О. Д. Перспективность применения дифференциальных экспресс-тестов при диагностике бруцеллеза крупного рогатого скота // Достижения науки и техники АПК. – 2015. – Т. 29, № 4. – С. 58–60.
3. Димова А. С., Димов С. К., Сизов А. А., Сизова Д. А., Аракелян П. К. Эффективность диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота в новой тест-системе ИФА // Ветеринария. – 2015. – № 8. – С. 18–20.
4. Бахри И. А., Дмитриев А. Ф. Причины массовых абортов среди крупного и мелкого рогатого скота в провинции Аль-Хассака (Сирия) // Аграрный Вестник Урала. – 2018. – № 1 (168). – С. 4–7.
5. Искандаров М. И., Гулюкин М. И., Гулюкин А. М., Искандарова С. С., Альбертян М. П., Федоров А. И., Слепцов Е. С., Винокуров Н. В., Федоров В. И. Бруцеллез животных в России : [монография]. – Новосибирск : Изд. АНС «СибАК», 2017. – 286 с.
6. Новикова М. В., Муковнин А. А., Барсуков Ю. И., Капустин С. И., Коломыцев С. А. Эпизоотическая ситуация по социально значимым и особо опасным болезням животных в Российской Федерации за 2018 год // Бизнес Партнер. – М., 2019. – С. 26–31.
7. Нурлыгаянова Г. А. Особенности проявления эпизоотического процесса при бруцеллезе в условиях Карачаево-Черкесской Республики : автореф. дис. ... канд. ветеринар. наук. – Ставрополь, 2013. – 21 с.
8. Юсупов О. Ю., Хаиров С. Г., Кабардиев С. Ш., Скляров О. Д., Климанов А. И., Ощепков В. Г., Дегтяренко Л. В., Девришов Д. А. Эффективность РНГА при бруцеллезе крупного рогатого скота, овец и коз // Ветеринария. – 2015. – № 11. – С. 22–25.
9. Патент 2667121. Российская Федерация, МПК G01N 33/569 (2006/01). Способ получения бруцеллезного эритроцитарного диагностикума для реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) : № 2016142827 : заявл. 31.10.2016 : опубл. 14.09.2018 / О. Ю. Юсупов, М. М. Микаилов, А. А. Халиков, Г. М. Шехилалиева, Э. А. Яникова, П. М. Кабахова, М. О. Дугричилова. – 5 с.
10. Мантурл Б. Г., Амарнатх С. К., Шинде Р. С. Обзор клинических и лабораторных особенностей бруцеллеза человека // Индийский журнал медицинской микробиологии. – 2007. – № 25. – С. 188–202.
11. Bulut H. Hing prevalence of bovine viral diarrheaеa virus-1 in sheep abortion samples with pestivirus infection in Turkey // Pakistan Vet. J. – 2018. – Iss. 38.1. – Pp. 71-75.
12. Passler T., Riddell K. P., Edmondson M. A., Chamorro M. F., Neill J. D., Brodersen B. W., Walz H. L., Galik P. K., Zhang Y., Walz P. H Experimental infection of pregnant goats with bovine viral diarrhea virus (BVDV) 1 or 2 // Vet. Res. 2014 Apr. – Iss. 4. – Pp. 45-38.

DIAGNOSTIC VALUE OF THE INDIRECT HEMAGGLUTINATION TEST (IHA) IN COMPARISON WITH ELISA AND OTHER SEROLOGICAL TESTS IN THE DIAGNOSIS OF BRUCELLOSIS IN CATTLE

Mikailov Mikail Muslimovich, Cand. of Vet. Sci., Leading Researcher of the laboratory of Infectious pathology of farm animals, Caspian zonal NIVI - branch of the Federal Agricultural Research Center of the Republic of Dagestan, Makhachkala, Russia.
Gunashev Shakhrudin Alievich, Cand. of Vet. Sci., Senior Researcher of the laboratory of Infectious pathology of farm animals, Caspian zonal NIVI - branch of the Federal Agricultural Research Center of the Republic of Dagestan, Makhachkala, Russia.
Chernykh Oleg Yurievich, Dr. of Vet. Sci., Prof., Director of the Kropotkin Regional Veterinary Laboratory, Kropotkin, Russia.
Khalikov Ahmed Aliaskhabovich, Researcher of the laboratory of Infectious pathology of farm animals, Caspian zonal NIVI - branch of the Federal Agricultural Research Center of the Republic of Dagestan, Makhachkala, Russia.

Keywords: brucellosis, cattle, laboratory diagnostics, methods, blood serum.

Abstract. The results of comparative diagnostic studies of blood sera from cattle for brucellosis from farms with different epizootic situations, performed in the laboratory of the Caspian zonal NIVI and the Kropotkin Regional Veterinary Laboratory, are presented. The diagnostic efficiency of the indirect hemagglutination test (IHA) with the use of erythrocyte antigen was studied in comparison with other serological methods, such as enzyme immunoassay (ELISA), agglutination test (RA), complement agglutination test (RSC), rose bengal test (RBP), immunodiffusion reaction with O-PS antigen (RID with O-PS antigen). In order to determine the specificity of serological tests, 52 blood serum samples from non-vaccinated animals from a safe farm were examined for brucellosis in RNGA, ELISA, RA, RSK, RBP and RID with O-PS antigen. All blood serum samples were tested with negative results. The sensitivity of the tested diagnostic tools was determined using 82 blood serum samples from cows immunized with the B. abortus 82 vaccine from a brucellosis-prone farm. The results of the studies showed that the infection in the herd proceeds in an acute form, as evidenced by a significant percentage of positively reacting to brucellosis of animals in the RID and high titers of RNHA, RA and RSK. Thus, a positive RNHA was obtained in 20 cases (24.4%), ELISA with the test system of LLC SPF "Sibbiotest" revealed 31 sick animals (37.8%), RSK - 20 (24.4%), RA and RBP - 17 (20.7%), ELISA test system from Biok - 15 (18.3%), RID with O-PS antigen - 9 (11%). It is important to note that the RNGA additionally identified animals that respond positively to brucellosis: to ELISA "Biok" - 5 (6.1%), RA and RBP - 3 (3.7%), RID - 11 (13.4%). The results of our studies have shown that the RNGA method is one of the most sensitive tests that allows to identify a high percentage of animals with brucellosis in a dysfunctional farm (24.4% of the studied ones), which is superior to the results of other serological methods. The results of comparative serological studies of bovine blood sera in RNHA, ELISA, RA, RSK, RBP and RID with O-PS confirmed the specificity of the tests and the high sensitivity of the RNHA method with brucellosis erythrocyte antigen.